基本信息

• 來源：GM12878細胞系源自一位白人女性的外周血B淋巴細胞，通過Epstein-Barr病毒（EBV）轉化獲得。
• 細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣，呈懸浮生長。
• 培養(yǎng)條件：通常使用RPMI-1640培養(yǎng)基，添加10%胎牛血清和1%青霉素/鏈霉素（P/S），在37℃、5% CO?的條件下培養(yǎng)。
• 傳代比例：建議1:2至1:4傳代。
• 凍存條件：60%培養(yǎng)基、30%胎牛血清、10% DMSO，液氮保存。
• 生物安全等級：BSL-1。

特性

• GM12878細胞的CYP2C19基因存在一個堿基突變（G→A），導致異常剪接位點的出現(xiàn)，使得該基因的5號外顯子發(fā)生40 bp缺失，最終導致截短的CYP2C19蛋白失去催化活性。
• 該細胞系支原體檢測為陰性，無菌操作。

應用

• 基因組學：用于研究人類基因組的結構和功能。
• 表觀遺傳學：研究基因表達調控的表觀遺傳機制。
• 免疫學：研究B淋巴細胞的功能和免疫反應。

注意事項

• 該細胞系為懸浮細胞，傳代時建議使用半換液法，避免直接倒掉細胞培養(yǎng)液。
• 收到細胞后需進行無菌操作，第一次傳代建議1:2傳代。
• 僅限于科學研究，不可用于動物或人類疾病的治療。

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??細胞常規(guī)說明:
??培養(yǎng)條件:89%基礎培養(yǎng)基+10%FBS+1%雙抗
??凍存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基礎培養(yǎng)液
??細胞質檢情況:不含細菌、真菌、支原體等微生物污染
??傳代建議:1:2~1:3傳代,2~3天換液1次
??特別提醒:簽收細胞后,如細胞狀態(tài)不佳,或培養(yǎng)中遇到問題,煩請當天盡快聯(lián)系,以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),請務必重視。
??懸浮細胞接收后的操作流程與注意事項
??1.如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室
??2.擰松瓶蓋,細胞瓶豎立培養(yǎng)8h(或過夜)
??3.待細胞沉底后吸除上層液體(含碎片殘渣,請小心操作),然后吸取沉底的細胞層(2ML左右轉移到新的培養(yǎng)瓶,加入新鮮的完(全)培養(yǎng)基(如細胞狀態(tài)較差可將血清濃度調高到15%)繼續(xù)培養(yǎng)
??懸浮細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
??1.將培養(yǎng)瓶/皿中的細胞重懸混勻
??2.吸取2/3或者一半混勻后的細胞懸液到新的培養(yǎng)瓶/皿
??3.分別在原瓶/皿和新分瓶的培養(yǎng)瓶/皿加入等量或者2倍的新鮮培養(yǎng)基,使細胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
??4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況和細胞密度,定期半量換液(每周2-3次),待細胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重復1項操作或者凍存
??貼壁細胞接收后的操作流程與注意事項
??1.收到細胞當天盡快更換新鮮完(全)培養(yǎng)基,第二天再進行消化處理
??2.如果細胞收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完(全)培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察。同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完(全)培養(yǎng)基,培養(yǎng)觀察
??3.若出現(xiàn)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)
??貼壁細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
??1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加適量0.25%胰(酶)進行消化細胞(注意把握消化時間)
??2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰(酶),加6~8ml 完(全)培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散
??3.取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐?全)培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
??4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復17項作或者凍存

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